Spectradyne视频：spectradyne在ISEV传染病2021上亮相：使用MRPS快速病毒滴度

...这里有一份文字记录供你阅读之用！

你好，我的名字是Jean-Luc Fraikin，我是spectradyne的首席执行官。非常感谢你收看我今天的演讲。您可能已经听说过我们的EV量化技术，但今天我将介绍微流控电阻脉冲传感(MRPS)如何提供准确而快速的病毒浓度测量，其速度远远快于使用活的生物滴度。

让我们首先回顾一下为什么病毒浓度一开始就很重要。原因基本上是因为病毒浓度是一个关键的实验变量，当你控制它时，你会有更严格的实验结果。这一点的价值真正体现在两个关键领域。

首先，当我们使用病毒作为治疗手段时，显然是基因疗法。在这些情况下，病毒的浓度等于药物的剂量。因此，它是一个关键的实验变量，对于更安全、更有效的产品来说，控制它是重要的。

其次，当病毒被用作化验读数时，例如，诊断测试。在这种情况下，浓度本身就是测试结果，所以您测量得越好，您在应用程序中的灵敏度和特异度就越高。

因此，底线基本上是病毒浓度是一个必须控制的关键变量，当它被控制时，我们最终会得到更严格的实验结果，以及更快的科学。这对每个人都有好处。

00：01：23 方法概述

那么，病毒滴度通常是如何获得的呢？黄金标准是活的生物滴度。这是一种组织培养技术，如果你曾经这样做过，你就知道这有多痛苦。最好的情况是需要几个小时才能得到答案，但可能需要几天的时间，而且非常容易出错。因此，它需要多次复制，仅整个组织培养基础设施就会带来巨大的时间和金钱成本。所以，我们想试着做得更好。

光学粒子分析方法受到这种应用的挑战，因为病毒像细胞外小泡(EVS)一样，是弱散射的生物反粒子。更不用说它们生活在多分散的复杂样品中，这很容易压倒光学方法。因此，我们也需要比这更好的。

这就是Spetradyne公司的微流控抗脉冲传感(MRPS)的用武之地。它提供快速和准确的集中，而且它是负担得起的，易于使用。

我们的技术以nCS1^TM的形式出现。这是一种台式仪器，可以提供准确的浓度，直径约为50纳米或更大。它使用电子检测，而不是光学技术来测量颗粒，它利用了微流体的一切，使它如此令人兴奋。它很容易采用，而且由于微流控墨盒是一次性使用的一次性墨盒，它们是无污染的：您不必在两次测量之间清洗任何东西，以避免交叉污染。例如，将其与在本生燃烧器下进行噬菌体滴度进行比较。另一个好处是，只需要三微升的样本就可以进行分析。

让我为即将到来的网络研讨会做一个快速介绍，该研讨会将由我们赞助的SelectBIO主办。它被称为包括SARS-CoV-2在内的快速准确的病毒定量。本次网络研讨会将于美国东部时间2021年2月9日星期二上午11：00举行。我们将请匈牙利自然科学研究中心的Zoltan Varga博士发言，并描述他使用MRPS对SARS-CoV-2进行的测量。您可以通过向我们发送电子邮件获取链接进行注册，也可以通过此注册链接访问SelectBIO注册页面。

00：03：40 nCS1的工作原理

如果您不熟悉nCS1，让我简要介绍一下它的工作原理。这项技术被称为微流阻式脉冲传感(MRPS)。在这种技术中，颗粒被一个接一个地计数，并尽可能直接地测量浓度和尺寸。

我们所做的是让所有的颗粒通过流体流动中的瓶颈，通过狭窄，每次一个颗粒通过那个瓶颈，我们就会得到右边的电信号，看起来像这样。

因此，我们对它进行了两点衡量。信号的大小告诉我们颗粒有多大，然后颗粒通过收缩的速度告诉我们测量的样品体积。因此，通过计数和体积测量，我们可以正确地确定浓度。

这是一个更长时间的测量，显示检测到了许多颗粒。你可以看到这里有几种不同大小的粒子。你可以直接从直方图上读出。

当我们将计数转换为浓度时，输出如下所示。这是一个在Y轴上的浓度和X轴上的颗粒直径的曲线图。你可以看到这个样本包含4种不同的颗粒大小。这只是直径50、90、120和150 nm的聚苯乙烯珠子的混合物，这种分辨率、准确性和易用性的组合是任何其他方法都无法实现的。在这一点上，我们有很多文献可以帮助你说服这一点。

00：05：04 测量示例

让我给你们展示一些测量的例子，但首先我将为佐尔坦·瓦尔加博士的演讲做个插曲，在稍后的ISEV-传染病会议上。他将简要介绍使用MRPS对SARS-CoV-2进行测量的情况。这将是东部时间下午2：50，请调到那里，如果你想了解更多，请参加我们的网络研讨会。

我要展示的第一个例子是对人腺病毒5型的测量，我想从展示原始数据开始。我们这里有一个基线，每次有一个粒子通过，我们就会得到一个向上的尖峰，用一个红点突出显示，就像我之前展示的那样。因此，我们正在一个接一个地计算病毒粒子--你可以看到你的病毒被实时检测到。

现在，当我们将其转换为颗粒浓度与尺寸的关系图时，这就是我们得到的结果。在本例中，我向您展示了同一个5型腺病毒样本的三个副本，我们可以看到样本中有一个清晰的、可识别的病毒种群，并且两个副本之间有很高的重复性。

这种测量在任何尺寸范围内都是定量的。当然，您可能对测量病毒浓度感兴趣，但这项技术还允许您量化非高峰颗粒物，这可能是重要的，具体取决于应用程序，我将对此进行描述。

当我们只测量病毒大小范围内的浓度时，我们看到的是非常准确、可重复性的测量结果。提醒一下，这是绝对浓度，测量每个样本需要大约5分钟，不需要组织培养。所以这是一个超级简单的测量装置，你知道的，15分钟。

00：06：48 应用1

接下来，让我描述一下使用这项技术可以做些什么。第一个例子是评估病毒制剂的纯度。在这种情况下，这是一个正在准备病毒的商业客户，我们测量了三个不同的纯化阶段。首先是底部的深蓝色粗品，你可以看到大小分布没有峰值。在第一步纯化后出现一个轻微的峰，然后经过第二步纯化，你可以看到病毒已经被浓缩，现在在这个样本的背景上突出了出来。对于该客户来说，这是一项非常重要的测量，因为它允许他们调整其净化过程的参数，以优化其材料的生产。

00：07：28 应用2

最后，我想强调这项技术的另一个关键应用：由于测量速度如此之快，它使您基本上可以实时测量病毒浓度，以优化生产。这里的测量显示的是粘液瘤病毒的粗制制剂。你可以看到样本包含了广泛的随机颗粒背景，可能是细胞培养碎片和蛋白质，而且有一个来自粘液瘤病毒的明显特征，就在我们预期的地方，直径约260 nm。当我们放大这个，你可以看到一个明显的峰值，我们可以量化这个样本中的病毒为2 × 10⁸个颗粒/毫升。所以这允许你在短短五分钟内采集你的生产样本的样本，在你生产病毒的过程中，几分钟后测量更紧密的浓度，然后等待浓度达到最佳和最大化，然后收获病毒。这对此应用程序具有难以置信的强大价值。

00：08：32 nCS1性能

最后，我想向你们展示几张幻灯片，描述这项技术的性能。第一个例子显示了一种逆转录病毒药物配方，一种系列稀释剂。你可以看到病毒在这里的分布有一个明显的峰值，当我们绘制浓度作为稀释系数的函数时，我们在测量中得到了非常线性的响应。最后，我将向您展示这项技术的动态范围。这显示了对单个样品的测量，直径从大约65 nm到5-6 μm不等。你可以看到这个样本中的浓度在一个样本内跨越了9个数量级，目前还没有其他技术可以提供这种测量。

00：09：18 不同样本测量<

我们的客户测量各种不同病毒的样本。如果您在此列表中没有看到您的，请发送电子邮件给我们以了解更多信息，或发送样品给我们，以便我们以高分辨率向您展示它是什么样子的。

00：09：29 结论

总而言之，spectradyne的技术在每一次测量中只需几分钟就能提供准确的病毒滴度，没有任何细胞培养的麻烦，这使您能够更快地进行更好的科学研究。这太棒了！

请联系我们了解更多-我们喜欢展示我们的技术，所以请给我们一个样品来看看你自己。感谢您抽出时间，希望您在接下来的会议中过得愉快。