Spectradyne的粒子分析博客

当每个粒子都计数时TM

Extracellular vesicles exosomes nanoparticles gene therapy are all done here

欢迎来到Spectradyne的博客!


目录

标题     日期   外泌体 病毒 脂质纳米粒 蛋白质 纳米颗粒
Spectradyne推出新的ARC颗粒分析仪 2022-11-01
ASV 2022的观测结果 2022-06-10
动态浓度分析-一种改进的MRPS计算浓度的方法 2022-06-10
发表亮点:血液储存条件影响红细胞来源的细胞外小泡(EVS)的大小和浓度 2022-02-01
其他mRNA冠状病毒疫苗相比如何? 2022-01-20
出版亮点:细胞外小泡(EVS)携带SARS-CoV-2刺突蛋白 2021-09-02
出版亮点:测量生物液中的细胞外小泡(EV) 2021-08-10
我怎么知道我的颗粒物标准的浓度? 2021-08-01
细胞外小泡(EV)测量的正交法 2021-07-10
冠状病毒疫苗中有什么? 2021-07-01
新的!用户教程视频库 2021-04-30
哪个测量更有用--粒子的流体力学直径还是其核心直径? 2021-03-27
聚乙二醇溶液是否含有过量的纳米颗粒,疫苗制造商是否应该担心? 2021-02-24
使用阳性对照确保颗粒大小和浓度的准确性 2020-12-29
宣布Spetradyne的视频库! 2020-11-28
在我的地板面漆中使用NanoDefense®?那是什么? 2020-11-03
spectradyne的nCS1如何衡量浓度? 2020-10-01
这款防晒霜里有什么? 2020-09-04
Saké or Soju? 2020-07-30
为什么选择微流体? 2020-07-20
专注对EV科学的重要性 2020-06-22
由spectradyne的nCS1支持的最新出版物 2020-06-08
使用spectradyne的nCS1进行迷人的病毒测量 2020-05-22
什么是“浓度谱密度”? 2020-05-12
Spetradyne的nCS1快速病毒滴度 2020-04-20
使用spectradyne的nCS1验证病毒纯化过程 2020-04-10
使用spectradyne的nCS1进行病毒量化 2020-04-02
你衡量你的背景吗? 2020-03-26
Spectradyne的nCS1公司以及引起COVID-19的病毒(又名“冠状病毒”) 2020-03-10
Spectradyne的nCS1增加了流式细胞术的价值 2020-03-05
Spectradyne参加2020年蛋白质科学周--PepTalk 2020-02-19
spectradyne参加2019年应用药物纳米技术展 2020-01-13
准确的EV量化 2019-11-19
ASEMV 2019年观测 2019-10-18
你真的在测量你的颗粒大小吗?对于MRPS,答案是肯定的 2019-10-06
你在听你的数据吗? 2019-09-24
任意多分散混合物的纳米颗粒测量 2019-09-10
适用于多种应用的大动态范围 2019-08-23
正交测量的利弊 2019-07-11
蛋白质聚集体测量的灵敏度限制 2019-06-03
Exosome纯化:当心虚假的峰值! 2019-05-29
在2019年ISEV上的spectradyne:日本京都 2019-05-15
Spetradyne在第15届Pegs年度峰会上 2019-05-07
spectradyne在2019年循环生物标志展上 2019-04-12
阻性脉搏传感(RPS)简史 2019-03-26
2019年PepTalk外卖 2019-02-26
关键应用概述 2019-02-07
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Spectradyne推出新的ARC颗粒分析仪

Spectradyne非常高兴地宣布推出我们的第二代产品--ARCTM颗粒分析仪。ARC是一项开创性的技术,用于分析复杂样品中的生物纳米颗粒,在单一仪器中提供准确的颗粒浓度、大小和单颗粒、定量、基于荧光的表型分析。ARC利用了我们的核心技术微流控阻性脉冲传感(MRPS)的成熟优势,并增加了我们的客户一直要求的:单颗粒、基于荧光的表型分析,以量化复杂混合物中的颗粒亚群。ARC将MRPS的电子颗粒分析和荧光定量表型分析的创新结合在一起,解决了广泛应用领域的关键分析挑战。基因治疗、病毒和包括细胞外小泡在内的其他纳米医学应用将从新平台中受益最大,因为这些颗粒必须在其他材料的复杂混合物中进行分析。ARC能够准确地量化这些纳米级的生物颗粒,直接在混合物中,同时提供纯度评估,因为MRPS也检测所有其他颗粒。通过能够检测复杂混合物中存在的特定亚群,如生物流体,ARC还具有推动新诊断开发的潜力。Spectradyne正在寻求合作,使用ARC来量化这种大小范围内基于颗粒的新的健康和疾病生物标记物,这是其他技术以前无法达到的。多年来,现有的nCS1TM用户一直在要求这种功能,spectradyne的开发团队在将这项技术推向市场方面做了令人难以置信的工作。我们期待着看到科学家们能用它做些什么!想了解更多关于ARC的信息吗?请查看以下资源:ARC产品页面视频:技术概述(1.5 min)视频:ARC的虚拟演示(6 min)视频:我们的2022年发布会特色:技术引进测量示例(EVS、病毒)荧光灵敏度演示专家小组的特点是:詹妮弗·琼斯博士(NIH/NCI)埃德温·范德波尔博士(阿姆斯特丹大学)仍有疑问,或想要获得报价?通过willnanobio@163.com联系我们的团队从防晒霜到烈酒再到冠状病毒疫苗,纳米颗粒无处不在--让我们继续测量吧!Spetradyne的新ARCTM颗粒分析仪,结合了荧光表型和MRPS颗粒大小和浓度。

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ASV 2022的观测结果

Spectradyne最近作为赞助商参加了在威斯康星州麦迪逊举行的美国病毒学学会(ASV)2022年年会。这是我们第一次参加这个活动,我们离开时真的印象深刻!来自世界各地的近1500名科学家注册参加了这次会议,出席人数非常多。这个小组非常认真和投入,研讨会和海报会议大部分时间都会一直持续到晚上10点! Spectradyne的出席让许多与会者大开眼界,因为他们中的许多人对自动化纳米颗粒尺寸和浓缩方法(如nCS1)几乎没有经验。几乎所有人都主要熟悉使用传染性分析(例如,空斑分析)或测量特定病毒粒子成分的化学/物理分析,如酶联免疫吸附试验和聚合酶链式反应技术来获得病毒滴度的经典方法。虽然这些技术显然是成熟的,但它们相当劳动密集型,可能需要几个小时到几天的时间才能完成。 当许多与会者了解到nCS1的微流体阻性脉冲传感(MRPS)技术可以在通常3-5分钟内产生总病毒滴度时,他们变得非常感兴趣!许多人认为这可能会改变他们的研究和病毒生产的“游戏规则”。一些人特别感兴趣的是nCS1在病毒分离/纯化过程中获得快速滴度的潜在用途,如图所示。这将提供对这一过程的近乎实时的监测,而以前没有简单的方法来实现这一点。 如前所述,我们发现与会者非常投入(而且很吸引人!),真的很感谢那些来到我们展台的人所做的努力,他们真诚地了解nCS1的技术,以及它对他们的工作有多大帮助!会议本身的组织和运作也非常好,因此我们真诚地期待着再次参加明年在佐治亚大学举行的ASV 2023。 这里不是为了政治,但最后一个有趣的观察是,在一次病毒学家会议上,除了少数人之外,所有人都戴着口罩--这是值得思考的! 从防晒霜到烈酒再到冠状病毒疫苗,纳米颗粒无处不在--让我们继续测量吧! 使用nCS1进行的快速滴度测量可以量化加工过程中的病毒浓缩。产品中病毒的浓度和纯度随着纯化的每一步而增加。

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动态浓度分析-一种改进的MRPS计算浓度的方法

在这里,我们描述了spectradyne部署了一种新的和改进的方法来计算使用我们的微流体阻性脉冲传感(MRPS)仪器测量的纳米颗粒浓度。 基本原理--MRPS如何确定浓度? 当纳米颗粒流过微流体盒中的传感狭窄时,MRP逐一计数并确定其大小-请访问我们的技术页面了解更多信息。 浓度是指每单位体积中的颗粒数量,因此从原始计数计算浓度需要知道颗粒被计数的分析物的体积。 在MRPS中,使用两个参数来确定样本量: 工厂校准的换算系数,用于根据样品流过传感收缩时的速度计算样品体积 样本流的速度,由粒子通过收缩时的平均通过时间确定--见右上图 有什么新鲜事吗?用于计算采样速度的粒子集 粒子平均传输时间的计算取决于平均值中包括哪些事件 老方法: 刚性参数设置用于计算采样体积的粒子事件。这在大多数应用程序中运行良好! 新方法: 应用的峰值过滤器设置用于计算采样体积的粒子事件。请看右下图。这在所有应用程序中都更好! 当用户改变过滤器时,浓度被动态更新。 在大多数应用中,默认过滤器-在数据处理时自动应用-将在准确确定浓度方面做得最好。用户不需要执行任何操作。 在特殊情况下,当需要自定义峰值过滤器来完全排除误报事件时,应用峰值过滤器后,浓缩精度将得到提高。 这对spectradyne技术的用户意味着什么? 更准确、更可靠的浓度测量,适用于使用spectradyne Tools版本2.5.0.314或更高版本生成的任何统计数据和组合文件。 新的分析方法不会更改升级前创建的统计信息和组合文件。 使用盒装日期在2021年11月1日之后的盒式磁带收集的原始数据有资格使用新方法进行再处理。 确保应用于数据的峰值过滤器正确地排除了任何假阳性事件,并提供对样本中真实粒子的准确评估,这始终是一种良好的做法。 从防晒霜到烈酒再到冠状病毒疫苗,纳米颗粒无处不在--让我们继续测量吧! 粒子瞬变示意图,给出粒子通过时间 用于计算浓度的粒子选择示例。

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发表亮点:血液储存条件影响红细胞来源的细胞外小泡(EVS)的大小和浓度

在这篇文章中,我们重点介绍了匈牙利自然科学研究中心科学家最近在《自然科学报告》上发表的一篇论文,该论文展示了spectradyne的微流体电阻脉冲传感(MRPS)方法在准确和可靠地量化复杂生物样本方面的能力。 T. Bebesi, D. Kitka, A., I. Csilla Szigyarto, R. Deak, T. Beke-Somfai, K. Koprivanacz, T. Juhasz, A. Bota, Z. Varga and J. Mihaly, "储存条件决定红血球来源的胞外囊泡的特征," Sci. Rep. 12, 977 (2022). 指向出版物的DOI链接 输血中使用的红细胞(RBC)必须保持在标准条件下,以减缓或停止细胞外小泡(EV)的产生,因为这些颗粒会在受血者中引起意想不到的免疫反应。这项研究的研究人员使用spectradyne的nCS1TM观察了不同存储介质中RBC来源的EV随着时间的推移而形成的情况。利用ATR-IR光谱和蛋白质组学方法对红细胞分解过程中形成的颗粒进行了进一步表征。 作者使用spectradyne的nCS1来测量两个不同群体的分解产物的大小和浓度,怀疑分别是EVS和蛋白质。两种存储介质中的EV浓度均随时间增加。然而,稳定介质SAGM减缓了EVS的形成,EVS的测量浓度低于单独在PBS中看到的EVS的浓度(结果如文章的图2所示)。 作者指出,由于输血产品中RBC来源的EVS的存在直接影响治疗的安全性和有效性,用于量化这些EVS的分析方法至关重要。与动态光散射(DLS)相比,作者更喜欢MRPS,因为“……该方法[DLS]无法可靠地表征多分散的尺寸分布,这使得它不太适合于生物流体来源的颗粒的定量分析。微流控电阻脉冲传感(MRPS)提供了一种基于库尔特原理的定量尺寸分布测定:它通过测量每个颗粒通过纳米孔时电流的变化来检测单个纳米颗粒。” 量化一个样本中的多个群体的能力增加了其他方法无法获得的维度,使研究人员有了新的见解,并更准确地理解了他们样本的内容。 从防晒霜到烈酒再到冠状病毒疫苗,纳米颗粒无处不在--让我们继续测量吧! 红细胞的显微照片

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其他mRNA冠状病毒疫苗相比如何?

随着SARS-CoV-2大流行的继续演变,我们继续接种疫苗!这一次,Spetradyne获得了另一种主流两剂疫苗的一小部分残留样本,我们将其称为疫苗#2(参见我们之前的博客文章,描述了疫苗#1的测量)。与1号疫苗一样,我们使用spectradyne的nCS1分析了2号疫苗。 与疫苗#1类似,并与我们对或多或少通过混合酒精相和脂相制成的 LNP配方的预期一致,结果表明,疫苗#2包含广泛的颗粒大小分布,其浓度跨越许多数量级-参见图1。 这两种疫苗相比如何?NCS1允许在任何大小范围内进行定量浓度测量-见图2。两种疫苗之间的一些细微差异是可以检测到的。特别是,2号疫苗在直径约为65 nm-750 nm的较小尺寸范围内包含的颗粒浓度明显较高(请注意,垂直尺度是对数的,因此两种分布之间的差异相当大)。 从这里的花生画廊中,我们是否可以推断出,鉴于引发足够的免疫反应需要更高浓度的颗粒,那么2号疫苗的效力就不那么强了?或者,也许这些浓度上的微小差异--即剂量--导致了两种疫苗的不同效果? 有传言称,该领域的nCS1用户正在准备使用微流控电阻脉冲传感(MRPS)进行更广泛的比较,以更仔细地测量这些疫苗,以及根本不同的基于病毒的COVID疫苗。敬请关注,当他们的结果可用时,我们将为您指明! 从防晒霜到烈酒再到冠状病毒疫苗,纳米颗粒无处不在--让我们继续测量吧! 图1.商用疫苗的测量2,绘制浓度光谱密度(CSD)与颗粒直径的关系图,使用两个微流控墨盒覆盖整个尺寸范围。 图2.商业疫苗1和疫苗2的测量结果的比较。

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冠状病毒疫苗中有什么?

我们感谢科学家、生产专家和物流团队的巨大努力,他们使我们能够在我们的社区、家庭和员工中部署COVID疫苗。从科学的角度来看,为其中一些产品开发的信使-RNA疫苗技术非常强大,有望成为未来疫苗开发战略的游戏改革者。 在这场史无前例的全球疫苗接种努力中,你有没有想过你可能接种的COVID疫苗中可能含有什么颗粒?我们知道辉瑞-BioNTech和莫德纳的疫苗是基于负载信使RNA的脂质纳米颗粒(LNP)--但是这些颗粒的大小分布是什么样子的? 我们发现了!Spectradyne获得了一种主流两剂疫苗的少量残留样本,并使用spectradyne的nCS1TM进行了分析。由于只需要3μL的样本进行测量,我们可以确信,没有人会因为这次测试而被阻止接受剂量! 测量结果如图所示。对于 LNP配方,正如预期的那样,颗粒尺寸分布绝大多数由直径小于100 nm的颗粒主导。值得注意的是,样品中含有直径高达2μm的易于测量的颗粒浓度。 尽管样品中存在微米大小的颗粒令人惊讶,但这些颗粒很可能是样品中的降解产物(例如,较小颗粒的聚集体),它们在测量之前随着时间的推移而形成:虽然努力保持疫苗的4℃储存条件,但样品的测量是在其建议的有效期之后24小时以上进行的。正如我们以前在基于蛋白质的药物配方中所展示的那样,随着配方经历压力(热应力或其他),降解产物随着时间的推移而稳步增加。当然,随着时间的推移,监测COVID疫苗中形成的大颗粒的浓度并验证建议的制剂有效期将是很有趣的。下次吧! 从防晒霜到烈酒再到冠状病毒疫苗,纳米颗粒无处不在--让我们继续测量吧! 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 图1.使用两个微流控药筒覆盖整个尺寸范围的商用两部分柯萨奇病毒疫苗的测量,绘制了浓度光谱密度(CSD)与颗粒直径的关系图。

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哪个测量更有用--粒子的流体力学直径还是其核心直径?

简短的答案是:它们只是对同一粒子的不同性质的测量,每种测量的值取决于应用。比方说,你想知道粒子在水溶液中扩散的速度:然后你想知道流体的直径。比方说,你想知道在纳米颗粒中可以放入多少药物配方:然后你想要的是核心直径。颗粒的流体力学直径本质上是一个坚硬的球体的直径,当颗粒在液体中运动时,它会受到与所讨论的颗粒相同的阻力。换句话说,它是一个坚硬球体的直径,它以与所讨论的粒子相同的速度扩散。 常用的纳米颗粒分析技术,动态光散射(DLS)和纳米颗粒跟踪分析(NTA),量化颗粒在样品中的扩散行为,并返回其流体动力学直径的计算。根据扩散测量计算流体动力直径涉及重要的假设:尤其是,计算对悬浮介质的粘度很敏感,而悬浮介质的粘度很难测量,而且本身强烈依赖于温度。更重要的是,即使假设是准确的,这种计算的结果是流体动力学直径,这对于某些应用(例如扩散传输实验)来说可能是一个有用的参数,但它不一定能说明颗粒的实际直径。 这里有一个真实的例子:脂类纳米颗粒(LNP)和脂质体为基础的药物载体在纳米医学应用中的循环寿命通常通过在颗粒表面加入长聚乙二醇链的“刷子”结构来延长。聚乙二醇刷结构帮助颗粒避免被人体的肝脏或肾脏从循环中清除,延长药物的有效寿命,最终提高药物的疗效。莫德纳和辉瑞-BioNtek的RNA SARS-CoV-2疫苗就是这样构造的。对于这种类型的粒子,流体动力学半径可能显著大于粒子的核心大小,因为聚乙二醇刷结构增加了对粒子的阻力,并使其具有更大直径的硬球的扩散特性。 谁在乎啊?制药商确实是这样做的,因为给任何以颗粒为基础的药物的剂量的一个重要指标是颗粒的有效载荷能力:可用于装载活性药物成分(API)的每个颗粒的体积。粒子的有效载荷能力更直接地由粒子的核心直径来衡量,因为有效载荷包含在粒子的核心内,而不是在其刷子表面涂层中。使用粒子的流体力学直径来计算聚乙二醇化粒子的有效载荷体积可能会导致显著的误差:对于直径100 nm的粒子,其表面有15 nm长的聚乙二醇刷(产生大约130 nm的流体动力学直径),计算的有效载荷容量可能高达实际容量的220%! 那么如何测量岩芯直径呢?低温电子显微镜是一个很好的选择。没有那么多时间和金钱吗?试一试Spectradyne的nCS1,它使用微流体阻性脉冲传感(MRPS)来快速准确地直接测量颗粒的核心直径(以及它们的浓度,这是添加纳米药物的另一个关键特性)。通过给我们发送免费测量的样品了解更多信息。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 具有表面刷子结构的脂质体的示意图,很好地说明了流体力学直径和核心直径之间的差异

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聚乙二醇溶液是否含有过量的纳米颗粒,疫苗制造商是否应该担心?

最近有关接种新冠肺炎疫苗的人中出现严重过敏反应的报道(见此处或此处)指出,聚乙二醇纳米粒中存在的纳米颗粒可能导致过敏反应,聚乙二醇纳米粒是脂质纳米粒气泡的一部分,稳定疫苗中的信使核糖核酸分子。 作为纳米颗粒分析创新的领导者,我们着手设计了一个简单的实验,使用spectradyne nCS1TM颗粒分析仪对聚乙二醇中存在的纳米颗粒的数量进行量化。在我们的实验中,我们制备了1%的PEG-200溶液在1PBS(磷酸盐缓冲盐水)中。用20 nm注射器过滤PBS稀释液,以减少背景颗粒的影响。 我们在我们最先进的微流控墨盒C-400和C-2000中测试了1%的PEG-200溶液,以跨越广泛的尺寸范围。如图1和图2所示,我们在该聚乙二醇200溶液中发现了大量尺寸小于1 μm的纳米颗粒。 图中显示,在280-2000 nm(图1,深绿色曲线)的较高尺寸范围内,1%PEG200溶液中的颗粒浓度为4.1 106颗粒/毫升,向较小直径方向浓度显著增加-这是我们经常在倾向于形成聚集体的溶液中看到的情况。 我们可以将1%聚乙二醇水溶液中的颗粒浓度与过滤到20 nm的1%吐温20/PBS溶液(淡绿色曲线)中的颗粒浓度进行比较。在1%吐温溶液中测得的颗粒浓度为3.5 105个颗粒/毫升,比在1%聚乙二醇水溶液中测得的颗粒浓度低一个数量级。 在65-250 nm的较小尺寸范围内(见图2),1%聚乙二醇200溶液中的颗粒浓度为1.48 108颗粒/毫升,而1%吐温溶液中的颗粒浓度为5.7 107颗粒/毫升。注意这张图中的垂直比例是图1中使用的250倍。同样,吐温溶液中纳米粒子的数量要少一个数量级。 因此,我们已经证明,1%的PEG200溶液含有至少108个颗粒/毫升的直径小于1微米的纳米颗粒。我们希望这项实验能对聚乙二醇颗粒在配方过程中的影响提供有价值的见解。 如果您在免疫原性方面有专业知识,我们将非常乐意听取您的意见!请发送电子邮件至willnanobio@163.com与我们联系。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 图1.大直径测量纳米颗粒浓度与直径的关系,比较1%的聚乙二醇200溶液和1%的Tween-20溶液 图2.小直径测量纳米颗粒浓度与直径的关系,比较1%的PEG-200溶液和1%的Tween-20溶液

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使用阳性对照确保颗粒大小和浓度的准确性

让我们面对现实吧,大多数颗粒分析仪几乎就是“黑匣子”:你把样品放进去,一段时间后你就会得到一个结果,无论它是真实的颗粒尺寸分布还是动态光散射(DLS)中的平均尺寸。当然,任何这些系统的“校准”都可以通过运行NIST可追踪的、以已知浓度混合的聚苯乙烯(或二氧化硅)珠子来检查。然而,这些珠子在任何给定仪器上的性能(在水中或在PBS中)可能不能代表同一仪器对您的实际样品的反应。对于光学系统尤其如此,其中样品颗粒和悬浮介质的折射率(可能还有粘度或其他因素)都会影响仪器的响应。 Spectrtradyne的微流控电阻脉冲传感(MRPS)的众多优势之一是,测量完全不依赖于颗粒材料和光学特性,如粘度或折射率。事实上,MRPS直接测量粒子体积:这意味着由纯金制成的体积为X的粒子将给出与相同体积的空心粒子相同的测量结果。因此,在MRPS系统的情况下,测量(任何材料的)校准珠时的性能直接指示仪器在任何其他样品颗粒上的性能,而对于光学系统则不是这样。 另一个优势是样本量小:MRPS技术使用的微流控墨盒需要非常小的样本量,对于spectradyne的nCS1,只需要3微升,足够小,可以可靠地测量扁虱唾液样本! 然而,MRPS的一个更大的优势是,每个颗粒都是单独测量的,一次测量一个。这意味着对任何给定颗粒的测量完全独立于样品中其他颗粒的测量。在纳米粒子跟踪分析(NTA)系统中则不是这样,在NTA系统中,可以证明这些仪器的检测限(LOD)根据样品成分的不同而变化,并可能导致虚假结果。 这意味着,对于MRPS系统中的测量,您实际上可以将已知浓度的校准球体直接添加到您的样品中作为阳性对照。通过这样做,您可以在样品中验证该仪器在颗粒大小和浓度方面都是准确的。 右图显示了这在实践中是如何工作的示例。在spectradyne的nCS1TM MRPS系统中,细胞外小泡(EV)样品运行了两次:第一次是单独运行,第二次是在150 nm NIST可追踪的聚苯乙烯纳米球中添加浓度为2.04 109个颗粒/毫升的微球。可以看出,两种样品都能很好地重叠,而加标的样品在150 nm处有一个清晰的峰,测得浓度为2.04 109个颗粒/毫升。这种类型的测量内控制不能用基于光学的系统进行,因为光散射对直径的六级依赖导致掺入的控制珠会完全“屏蔽”仪器对样品颗粒的响应! 通过在MRPS系统中使用测量中的阳性对照,可以确保每次测量的颗粒大小和浓度的准确性。这在受监管的环境中可能尤其重要,在这种环境中,通过测量内控制大大简化了证明测量可追溯性的过程。 你的粒子分析仪能做到这一点吗? 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 在spectradyne的nCS1TM MRPS系统中,EV样本测量了两次:一次是单独测量,然后是150 nm珠子的测量。图形重叠直观地显示了两者的重复性,而第二个样品中的加标准珠则定量地证明了测量的准确性。

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在我的地板面漆中使用NanoDefense®?那是什么?

冠状病毒封锁今年刺激了许多家居装修项目。你重新装修过硬木地板了吗?如果您使用的是Varathane NanoDefence®(法国右侧的加拿大产品照片),您可能会想--纳米部件到底是什么?那么,我在这一加仑里到底能得到多少纳米颗粒呢?嗯,我们用spectradyne自己的nCS1进行了测量!(点击此处了解该技术的更多工作原理)。 根据记录,我们完全独立于Varathane进行了这项测试,也没有从公司获得任何补偿--我们只是好奇! 纳米部分:样品中的颗粒大小分布如下图所示。我们在75 nm左右的颗粒大小分布中发现了一个明显的峰值--这些氧化铝颗粒为最终涂层提供了制造商所声称的强度和耐用性。Spectradyne可以证明这两种说法的正确性,从0岁到5岁的孩子在地板上长大后发现:在无数次室内迷你曲棍球比赛后,没有观察到明显的穿着。 这加仑汽油里有多少纳米粒子?测得粒径在60~100 nm范围内的总颗粒浓度为5.0 1014 particles/mL。这是一个非常高的浓度,但由于颗粒很小,它们不会非常强烈地散射光线,而且产品在使用前大多是透明的,略有乳白色。顺便说一句,这些粒子是弱光散射体,这使得它们很难用光学方法检测和量化。无论如何,使用每加仑3785毫升的换算系数...带上这五个……我们得到了大约1.9 1018个粒子!哇!。这是一笔75美元/加仑的交易! 这项实验是我们正在进行的EveryDayTM纳米粒子系列的一部分-点击此处阅读更多关于普通材料的nCS1测量。 你们有没有有趣的样品想让我们量一量?我们通过免费测量几个样品向科学家展示我们的技术--给我们寄一个! 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 在这项研究中测试的地板饰面 Varathane Nano Defense®地板涂饰剂中的粒度分布。模式中心在75 nm附近的颗粒是添加到产品中的氧化铝纳米颗粒,以增强强度和耐用性。在直径150 nm处的次级布居是在测量前添加到样品中的聚苯乙烯对照粒子。

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spectradyne的nCS1如何衡量浓度?

Spetradyne的nCS1TM使用微流控电阻脉冲传感(MRPS)来检测颗粒并测量其浓度与颗粒直径的函数关系。MRPS是库尔特计数方法的现代微流体实施,库尔特计数方法几十年来一直是临床上计数大颗粒和细胞的黄金标准。 MRP以一种简单而非常直接的方式工作: 未稀释的分析物流经测量狭窄处(见右图) 每个超过明确大小阈值的粒子在通过收缩时都会被计算在内 对于每个颗粒,测量样品体积的流速 Voila!这就是尽可能直接计算浓度所需的全部内容:将测量的粒子数量除以样本体积,样本体积也测量: 由于每次检测到颗粒时都会测量体积流率: 流量是连续测量的,每次测量通常要测量数千次 流量随时间的任何变化都会被考虑在内 粘性样品同样可以测量得很好 微流体还提供了其他重要的优势: 固定尺寸传感收缩和其他流体结构是使用为半导体行业开发的高精度制造技术制造的-可重复的几何结构确保了一致的测量结果。 而且,微流控通道很小!这意味着只需要3微升的珍贵样本进行分析。 其他测量颗粒物浓度的技术在报告浓度时会做出重要的假设。例如,纳米粒子跟踪分析(NTA)使用显微镜拍摄粒子随机扩散的视频,必须假设在测量过程中没有粒子漂入或漂移出视场或焦平面。此外,NTA必须能够从一开始就“看到”粒子,这是一个有据可查的挑战。其他成像技术需要在检测之前将颗粒固定在衬底上。由于被捕获颗粒在成像表面的扩散动力学和亲和力是样品组成和颗粒尺寸的复杂函数,这些方法只能估计相对浓度。动态光散射(DLS)是一个失败者,ASTM标准本身规定的浓度根本不是定量的。 准确的浓度测量对于降低测量变异性和进行良好控制的科学实验至关重要。在最近的网络研讨会上,请听两位各自领域的领导者解释原因。我们以前也写过很多次这个主题(例如,在这篇博客文章和这篇应用笔记中)。 通过向我们发送一两个演示样本,了解nCS1直接而准确的浓度测量如何帮助您的工作! 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 荧光颗粒通过Spectrtradyne MRPS分析色谱柱的传感收缩。粒子在图像中从左向右流动。

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这款防晒霜里有什么?

我们一直在想,今年夏天,当我们在户外活动中练习社交距离时,我们一直在给自己和孩子涂防晒霜中的什么。让我们来看看! 物理防晒板通常使用亚微米级的二氧化钛(二氧化钛)和氧化锌(氧化锌)颗粒来分散太阳的有害紫外线,使其远离皮肤细胞。其他防晒霜则使用化学阻滞剂,如阿夫苯宗、辛氧草酸酯和奥苯酮,它们会在光线到达皮肤之前吸收光线。这是否意味着化学防晒霜是所谓的“无纳米”?哪种防晒霜能让你的性价比更高? 我们使用spectradyne的nCS1TM 来测量四种不同防晒配方的颗粒含量:物理防晒剂防晒锌by Neutrogena(SPF 50,样本A)、铜通水宝宝(SPF 50,样本B)、白蛋白植物敏感矿物(SPF 30,样本C)和化学阻挡剂纯防晒(SPF 50,样本D)。作为一种化学阻滞剂,样品D在其活性成分清单中没有列出流行的氧化锌或二氧化钛。 右侧的图1显示了由nCS1测量的每种防晒霜配方的粒度分布。引人注目的是,化学防晒剂纯防晒(样本D)含有50-300 nm尺寸范围内更高浓度的纳米颗粒,而铜通水婴儿(样本C)!同样有趣的是,Alba Bonanica敏感矿物防晒霜(样本C)的纳米颗粒含量高于铜通防晒霜(B),尽管其SPF较低。 最后,与美元和美分相比,这些微粒的表现如何?虽然纳米颗粒的浓度确实随着物理阻滞剂中成本的增加而增加,但你仍然可以用廉价的材料获得最多的颗粒(见右侧的图2)。 你可能会问,“谁在乎?”,对于这个问题,spectradyne可能会回答,“谁说纳米颗粒分析不好玩?” 这项实验是我们正在进行的EveryDayTM纳米粒子系列的一部分-点击此处阅读更多关于普通材料的nCS1测量。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 图1.四种不同防晒霜的颗粒分析。样品D是一种化学防晒霜,但令人惊讶的是,它含有比其他物理防晒剂更高浓度的纳米颗粒 图2.用于测试的防晒霜的每美元直径在50-300纳米之间的颗粒数量。虽然防晒霜D是一种化学防晒剂,但它比公开含有纳米颗粒的氧化锌或二氧化钛的物理防晒剂便宜得多,因此每美元的微粒数量最高

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Saké or Soju?

您尽职尽责的记者在京都参加2019年国际胞外囊泡协会会议时,受到了一次日本酸奶品尝活动的款待。虽然这一活动非常令人愉快,但在他不合格的舌头看来,所有的萨凯都很美味,他希望能有一个更精确、更定量的衡量标准来评估它们。 幸运的是,spectradyne的应用程序团队做到了!三种类型的日本大米发酵饮料Saké和三种类型的soju(一种历史上也以大米为基础的韩国酒)被获取并在nCS1上进行了分析。 撇开个人忠诚不谈,烧酒和烧酒之间的一个关键区别是,烧酒传统上是发酵后蒸馏的,而烧酒则不是。根据生产过程中的这些差异,可以合理地预计Saké含有比烧酒更高的颗粒浓度:烧酒的蒸馏将从最终产品中去除蛋白质和颗粒,从而导致颗粒浓度更低。 虽然这是一个很好的故事,但这个假设并没有得到测量结果的支持(请参见右侧的测量结果)!同一类型的白酒样品彼此的颗粒大小分布相似,但蒸馏的烧酒样品的颗粒浓度是SAKé的10-20倍。奇怪的是,烧酒样品3显示出与其他烧酒样品不同的粒度分布。 根据这个令人困惑的结果,我们发现大多数烧酒实际上不再是以传统方式蒸馏,而是通过稀释红薯乙醇并给其调味而制成的,从而为我们的惊人结果提供了一个可能的解释!下一步:将观察到的差异与口味相关联。 这项实验是我们正在进行的EveryDayTM纳米颗粒系列的一部分-请点击此处阅读更多测量细节。 如果您在酒类行业(或我们的任何其他应用领域),请给我们发送一个样品! 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 享受一些生鱼片和(冷的)saké! 看看saké和soju中粒子分布的惊人差异(点击图表查看放大图)。阅读为什么我们认为文本中的数据是这样的。

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为什么选择微流体?

Spetradyne的微流体阻性脉冲传感(MRPS)是一种成熟技术的现代实现,该技术通常被称为“阻性脉冲传感”(RPS),也称为库尔特原理。库尔特原理几十年来一直是细胞和其他颗粒计数的黄金标准方法,尽管在我们最近的创新之前,它的性能一直限制在微米级,高于病毒、细胞外小泡(EV)和纳米药物所在的大小范围。 那么,spectradyne是如何将这一久经考验的黄金标准提升到50纳米或更小的呢?答案之一就是微流体!将基本的RPS技术嵌入一次性微流体盒中,能够整合关键的工程功能,提供用户喜爱的强大好处。 极小的样本量使全新的科学成为可能。因为只需要3微升的珍贵样本(如果你有好的吸管技能,甚至更少!),nCS1已经被用来定量昆虫唾液中的细胞外小泡(EV)--尝试用另一种测量技术来做这件事! 嵌入式过滤器可以直接测量复杂的生物样本--包括血浆!例如,请看辉瑞公司的这张海报,它显示了对小鼠血浆中纳米颗粒的定量分析。嵌入到每个滤芯中的上游过滤器能够在较长的测量时间内平滑地测量这类样品。 高度一致的墨盒特征,如传感收缩本身,确保每次都能获得准确、可重复的结果。墨盒是使用计算机芯片制造技术生产的,侧面具有小至几百纳米的高度受控特征。这种控制水平消除了RPS其他实施所需的繁琐的校准程序:spectradyne的微流控分析色谱柱是在工厂预校准的。 在本技术简介中了解微流控技术的更多优势。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 Spectradyne的微流控墨盒仅使用3 μL的贵重样品即可实现快速可靠的测量

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使用spectradyne的nCS1进行迷人的病毒测量

病毒学家使用spectradyne的CS1TM颗粒分析仪来更深入地了解他们的病毒颗粒。CS1TM提供的丰富信息使研究人员能够表征和准确量化他们的病毒颗粒,从而显著节省时间并降低过程变异性。NCS1检测多种病毒类型的能力,即使在复杂的生物介质中,也提供了许多有趣和独特的测量结果。在这里,我们展示几个值得注意的病毒测量示例。在图1右侧所示的第一个例子中,粘液瘤病毒样本在其细胞培养液中进行测试,几乎不需要准备样本。粘液瘤病毒是直径约200 nm至300 nm的砖状病毒粒子。nCS1TM能在高于高浓度培养基底面260 nm处检测到病毒群。 第二个例子,如图2所示,是野生型B型流感病毒(WT)和变异型病毒之间的比较。每个样品都被添加了208 nm的聚苯乙烯小球作为阳性对照。野生型样本显示病毒颗粒的平均直径为100 nm。突变病毒在相同大小范围内没有表现出分布高峰的证据,这表明突变影响衣壳的形成。因此,这种类型的数据可以为科学家研究突变对病毒的影响提供关键信息。第三个有趣的例子是马拉巴病毒的测量,如图3所示。据透射电子显微镜报道,马拉巴病毒颗粒的圆柱径为∼65 nm,长度为∼180 nm。NCS1的非光学电子传感技术可以直接测量颗粒体积-您可以在此处阅读更多内容。光学技术必须假设为球形,然后根据被测量的其他一些物理性质来推断粒子的直径。通过直接测量颗粒体积,如spectradyne的nCS1TM所做的那样,可以计算出颗粒的等效球径(ESD)。马拉巴病毒颗粒的尺寸给出了圆柱形体积和相同体积的球体的ESD,尺寸约为100 nm。如图所示,这正是nCS1TM所测量的!在早些时候的帖子中,我们已经描述了nCS1TM如何提供一种快速而简单的方法 来测量病毒滴度,以及如何使用它来改进病毒纯化过程。正如上面的例子进一步证明的那样,Spetradyne的技术还提供了对病毒物理特征的独特见解,提供了用其他方法无法获得的更丰富的信息。 Spectradyne的技术价格实惠,易于使用,也易于采用。想了解更多关于它如何节省病毒学家时间的信息吗? 请访问我们的病毒应用程序页。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 图1.粘液瘤病毒样本的测量,在其细胞培养液中进行测试,几乎不需要准备样本。 图2.一种野生型B型流感病毒(WT)和一种变异形式的比较。每个样品都被添加了208 nm的聚苯乙烯小球作为阳性对照。 图3.马拉巴病毒的测量。据报道,马拉巴病毒颗粒的圆柱形直径为∼65 nm,长度为∼180 nm。

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什么是“浓度谱密度”?

许多人看着我们的颗粒浓度图,问道:为什么垂直轴的单位是颗粒/毫升/纳米?这是什么意思?我们称这些分布为浓度谱密度(CSD);这表示每单位样品体积(以mL为单位)每单位颗粒直径(以纳米为单位)的颗粒数量。通过包括“每单位颗粒直径”部分,可以创建一个已经通过柱大小归一化的直方图,这意味着可以很容易地将该直方图与其他直方图进行比较。如果要计算粒子直径范围内粒子的绝对浓度,则需要在所需范围内进行积分(换句话说,求和),从而生成具有所需条带宽度的大小直方图。相加后的结果将是您选择的存储箱大小下每毫升粒子数量的直方图。 如果您遇到在垂直轴上仅使用粒子/毫升的粒子大小分布,则数据已经针对某个定义的条带大小进行了入库(如果不进一步挖掘,您可能不知道该大小)。如果要将此入库分布与另一个分布进行比较,则必须找出每个分布使用的入库大小,因为图形上任何点的浓度(垂直轴值)取决于所使用的入库大小。 我们在spectradyne使用CSD,因此我们可以快速、轻松地直接比较多个运行/样品/墨盒大小的结果,而不必担心箱的大小,也不必进行任何转换。注意,以这种方式,CSD不仅与箱的大小无关,而且也与用于测量的盒参数无关。右边的曲线图说明了这一点,显示了两个不同的样本,每个样本都在两个不同大小的试剂盒中运行,但结果在软件中立即具有可比性,无需进一步计算。注意,每个墨盒覆盖不同的标称尺寸范围,使我们能够覆盖几乎100倍的颗粒直径范围(颗粒体积的百万倍范围!),但在墨盒范围重叠的地方,测量结果重叠得很好。还要注意的是,试剂盒仅使用3μl的样品。您可以在这里阅读有关我们的墨盒的更多信息。 如果您的粒子分析仪没有绘制CSD图,请询问供应商原因!您需要了解他们的数据是如何入库的,以便对分布进行有效的比较。在spectradyne,我们一直使用CSD,为您处理所有这些问题。 Spectradyne的技术价格实惠,易于使用,也易于采用。想了解更多关于它如何节省研究人员时间的信息吗?请访问我们的应用程序页面。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 该图显示了两种不同样品的测量结果,每个样品都是在Spetradyne的两个一次性微流控墨盒中测量的

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Spetradyne的nCS1快速病毒滴度

测量病毒滴度,即样本中的病毒浓度,是病毒学中的一个重要程序。现代快节奏的研究和目前竞相开发针对新冠肺炎大流行的疫苗,突显了建立一种快速而简单的病毒定量方法的必要性。传统的病毒滴度测定方法费时费力,而且重复性差。空斑滴度和荧光焦点分析(FFA)技术需要对病毒进行连续稀释,细胞感染和潜伏期的等待期可能会持续数天。其他方法如定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验可在数小时内完成,但定量聚合酶链式反应对污染敏感,而酶联免疫吸附试验具有高度的选择性,需要事先了解特异性抗体与抗原的相互作用。透射电子显微镜(TEM)的定量是昂贵的,需要繁琐的样品准备和熟练的操作员。Spetradyne的微流控脉冲传感(MRPS)技术在几分钟内提供完整而准确的分析,并且消耗不到3微升的样品。Spetradyne的 nCS1TM系统使用一次性微流控墨盒,消除了样品之间的交叉污染,并允许快速检测大量样品。利用非光学电子传感技术,nCS1TM可以直接检测和定量复杂生物样本中的病毒颗粒,节省了大量的样本准备时间。该系统实用性强,自动化程度高,使用方便。 技术 方法 方法 时间 劳工 成本 MRPS (nCS1) Viral particle Excellent Minutes Low Inexpensive Plaque titer Infectivity assay Poor Days High Inexpensive FFA Infectivity assay Poor Days High Expensive qPCR Viral nucleic acid Excellent Hours Moderate Expensive ELISA Viral protein Good Hours Moderate Inexpensive TEM Viral particle Excellent Weeks High Expensive 右边的病毒测量示例展示了nCS1检测各种病毒的能力,从人腺病毒和HIV病毒到小鼠白血病病毒。病毒样本的大小和浓度在几分钟内就被准确而快速地测量出来。Spectradyne的技术价格实惠,易于使用,也易于采用。想了解更多关于它如何节省病毒学家时间的信息吗?请访问我们的病毒应用程序页面。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 具有spectradyne nCS1TM特征的人腺病毒样本。 具有spectradyne nCS1TM特征的人腺病毒样本 以Spetradyne nCS1TM为特征的小鼠白血病病毒样本

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使用spectradyne的nCS1验证病毒纯化过程

在越来越多的应用中,需要严格的过程控制,以确保高纯度的病毒制剂,包括疫苗、用于基因治疗的病毒载体和溶瘤免疫治疗。 现有的纯化方法,如超速离心法、沉淀法、层析法和密度梯度法,都是有选择性的,并不适用于所有病毒。因此,在建立有效的纯化方案时,有必要对每个步骤进行研究,以建立从其生长环境中的杂质(例如,培养基或细胞污染物)中分离病毒的最合适方案。 在每个纯化阶段后对病毒进行快速准确的定量,可以实现快速反馈,为决策提供信息,并验证所选纯化方法的效率。 Spetradyne的nCS1TM是一种先进的、易于使用的微流控技术,可以快速评估病毒制剂的质量。无需细胞培养,只需3微升样品,即可在几分钟内完成完整而准确的样品分析。 您可以阅读我们之前的一篇博客文章,详细介绍了nCS1对病毒量化的价值。 右边的例子说明了nCS1的高质量数据如何在评估连续病毒纯化策略的有效性时为研究人员提供关键信息。 最初的制剂在测量的大小范围内(125-600 nm)没有显示出病毒种群的证据。第一个浓缩步骤,纯化1,未能分离培养基本底以上的病毒颗粒。然而,纯化的2样品在230 nm处有一个明显的峰,表明第二步纯化对病毒颗粒的纯化效果要好得多。 Spectradyne的nCS1TM是病毒产品流程开发的完美工具--它提供快速结果,同时价格实惠、易于使用和易于采用。 想了解更多关于它如何节省病毒学家时间的信息吗?访问我们的病毒应用程序页面。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 使用nCS1TM对样品纯化步骤进行定量分析,可以做出更明智的决策,并加快研发速度。

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使用spectradyne的nCS1进行病毒量化

随着当前新冠肺炎的爆发,对科学家来说,快速准确地量化病毒浓度对于疫苗、病毒抗原和抗病毒药物的研发比以往任何时候都更加关键。病毒颗粒的准确浓度测量对于评估病毒的生物活性和负载效率是至关重要的。 传统的病毒定量方法如活生物滴度法、荧光斑点法(FFA)、定量聚合酶链式反应(QPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA法)耗时长、劳动强度大、样本量大。而纳米颗粒跟踪分析(NTA)等光学颗粒计数技术不具备准确计数病毒颗粒所需的灵敏度,因为病毒比光学衍射极限小得多,并且相对于周围的水介质具有较低的折射率对比度。 相比之下(双关语),spectradyne的nCS1TM仪器使用电子传感(非光学)来检测最先进的一次性微流控墨盒中的病毒颗粒。该系统实用且易于使用-在几分钟内提供总病毒计数-微流控实施只需3 μL样本即可完成准确分析,节省了宝贵的分析物体积。电学测量不需要光线照射样本,因此病毒可以直接在复杂的生物样本中进行定量,如细胞培养基或血浆。 微流控墨盒是一次性使用的,消除了样品之间交叉污染的风险和样品运行之间耗时的清洁任务。 T右边的一系列稀释实验显示了nCS1TM在浓度测量方面的精确度。四点稀释系列是对一家基因治疗公司的逆转录病毒药物制剂进行的。 病毒种群很容易被检测到,在其他颗粒的广泛背景下是一个突出的峰值。正如预期的那样,病毒浓度随着稀释因子的增加而线性下降:绘制整个范围内测量的相对浓度与稀释因子的相关系数为1.00。 nCS1TM能准确定量复杂生物样本中的病毒颗粒,并对浓度表现出高度的线性响应。 SSpectradyne的技术价格实惠,易于使用,也易于采用。想了解更多关于它如何节省病毒学家时间的信息吗?访问我们的病毒应用程序页面。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 不同稀释程度下,病毒浓度与颗粒直径的函数关系的测量 这个曲线图显示了测量的病毒浓度作为稀释的函数的比例,显示了预期的单位比例

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你衡量你的背景吗?

在许多分析科学中,在测量感兴趣的样品之前对背景信号(或空白)进行量化是实验设计的重要组成部分,也是确保有意义结果的关键要求。阳性测试信号必须与背景信号电平进行比较,以评估其重要性,并排除背景对结果解释的影响。例如,在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,重要的是测量不含目标抗原的阴性对照反应的信号,以获得其他反应的基线信号。并不是每个人都认为背景测量在粒子分析中的重要性,尽管同样的基本原理也是正确的。与此相关的一个常见情况是,在测量之前必须稀释感兴趣的样品-在这种情况下,必须测量稀释剂本身的颗粒含量,并在随后的分析中加以说明。测量的背景水平还可以通知测量协议:例如,如果感兴趣的样品的浓度为1109每毫升粒子数,稀释剂中的背景含量为1108相同粒径范围内的每毫升颗粒数,那么很明显,在测量值不再有意义之前,样品的稀释度不能超过10倍。这些实验界限只能通过仔细测量得到。由于常用技术的局限性,在粒子分析中通常不考虑这样的控制实验。大多数技术,包括光学技术,如纳米颗粒跟踪分析(NTA)和动态光散射(DLS),都不是可加性的。对于这些技术,测量组合样品A+B不等于样品A和样品B测量的总和。大多数研究人员理解为什么动态光散射不是加性的-这是因为DLS只报告样品中所有粒子的偏平均值。然而更令人惊讶的是,由于它被标榜为单粒子测量技术,纳米粒子跟踪分析也不是附加的。我们和其他人显示了这个很明显,下次你在实验室的时候,你可以很容易地为自己做测试(如果你有足够的装备,甚至可以在家工作!)。Spectradyne公司的nCS1可以逐个测量粒子,每个粒子都真正独立于其他粒子。因此,微流控电阻脉冲传感(MRPS) 是一种真正的加法测量技术,因此在复杂介质(如血浆、尿液或细胞培养基)中具有巨大的定量能力。右图是一个很好的例子:需要在血浆中直接定量的纳米颗粒疗法;从总样本中减去血浆背景,可以直接而准确地测量治疗粒子本身。在这种复杂的介质中直接测量是快速和容易的MRP-阅读我们与辉瑞公司进行的一项试点研究。,在这里.COVID-19隔离期间在家工作时的思考。当心! 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 96孔ELISA板。一个与酶相连的抗体将识别每个孔中的目标蛋白。当比色底物加入样品中时,酶反应会引起颜色变化。图片来源:深圳市博明兴医疗器械有限公司 此图显示了使用Spectradyne的nCS1进行的差分测量TM公司有或没有纳米颗粒治疗的血浆。

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Spectradyne的nCS1公司以及引起COVID-19的病毒(又名“冠状病毒”)

Spectradyne及其员工非常关注科维德-19暴发及其对全世界人民健康的影响。虽然我们的工作人员目前没有生病或接触病毒测试呈阳性,但我们保持警惕,并鼓励所有人遵循最佳做法,避免感染这种疾病并将其传播给其他人。作为一个科学问题,导致这种疾病的病毒,被称为“严重急性呼吸综合征冠状病毒2”(SARS-CoV-2),或者“2019新型冠状病毒”(2019 nCoV),提出了一个有趣的挑战。它首先由中国的科学家测序,后来由世界各地的其他实验室测序。它是一种单链RNA包裹的病毒,与引起SARS的病毒密切相关。SARS是一种2002-2004年在人类身上发现的疾病,但此后再也没有出现过。透射电镜图像在网络上可以找到的病毒,如右图所示,显示的是从一名人类患者的细胞中出现的SARS-CoV-2病毒。从物理特性的角度来看,SARS型冠状病毒是有趣的:冠状病毒是包被和多形性(可变大小),其表面有一个尖峰糖蛋白结构的“冠冕”。结果得到了直径约为80-120nm的多分散粒径分布,在Spectradyne的nCS1检测范围内广泛的病毒包括流感病毒、HIV、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒(AAV)、人单纯病毒(HSV)、小鼠白血病病毒(MLV)等多种病毒。在其中一个第一次示威利用MRPS技术,我们展示了T7噬菌体,一种常用于噬菌体展示随机肽的细菌病毒,直径为55-65纳米,可与丙型肝炎等无包膜的小病毒(直径为55纳米)相媲美。噬菌体浓度通常是在噬菌体扩增、浓缩和纯化后,利用生物效价测定的,这一过程通常需要几个小时。MRPS用于直接、快速(几秒钟)测量T7噬菌体的大小和浓度,这是一种全电子分析,不需要基于传染性的滴定。思百达因nCS1TM公司因此可以很容易地应用于测量SARS-CoV-2的直径和浓度,当然这只能在设备齐全,BSL3实验室。我们鼓励具有这些能力的研究人员考虑nCS1作为一种快速量化病毒的方法。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 这张扫描电子显微镜图像显示,从美国一名患者身上分离出的SARS-CoV-2呈黄色(也称为2019 nCoV,导致COVID-19的病毒),从实验室培养的细胞表面(蓝色/粉红色)中冒出。

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Spectradyne的nCS1增加了流式细胞术的价值

最近,spectradyne从客户那里得到了积极的反馈,这些客户也使用流式细胞仪来定量细胞外小泡(EV)或血浆等生物液中的其他颗粒。这些客户发现Spetradyne的微流阻式脉冲传感(MRPS)具有价值,主要原因有三个:首先,nCS1TM使用的非光学检测方法提供了流式细胞仪无法获得的颗粒浓度和尺寸信息。准确测量生物标志物和治疗药物的浓度,如细胞外囊泡、脂质体或合成纳米颗粒,对于减少变异性和得出明确的实验结论至关重要(请参阅此处的更多讨论)。正如我们在其他地方所写的,nCS1TM提供了对血清、细胞培养液和大多数EV制剂等异质生物样本中小颗粒的更准确的浓度和大小测量。同时使用基于荧光的流式细胞术和MRPS提供了单独使用流式细胞术无法获得的独特和完整的样本分析。其次,nCS1TM提供了一种快速、简便的样品纯度定量方法。虽然基于荧光的流式细胞术可以是一种强大的技术来计算复杂样品中特定标记的颗粒,但它很难测量样品中也可能作为污染物存在的未染色颗粒。正交测量很重要!用nCS1TM只测量3 μL同一样品,就可以得到总颗粒计数和大小--这是确定样品纯度所缺少的部分。最后,spectradyne的技术在准备用于流式细胞仪分析的样品方面节省了大量的时间和成本。流式细胞仪的测量对总颗粒浓度很敏感:光束中多个颗粒的重合(称为“蜂拥而至”)很难检测到,可能会产生不正确和误导性的结果。Spetradyne的nCS1TM快速分析提供了样品中颗粒的总浓度,这是确保第一次选择正确的流式细胞仪稀释系数所需的关键信息。 Spectradyne的nCS1TM提供了不同生物样品中颗粒的精确浓度和大小,并凭借其非光学检测方法提供了仅通过光学方法(如流式细胞仪)无法获得的样品组成的新见解。了解如何在此处增强您的流式细胞仪分析。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 查看spectradyne独特技术的概述

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Spectradyne参加2020年蛋白质科学周--PepTalk

Spetradyne再次参加了一年一度的PepTalk:蛋白质科学周。该会议每年在圣地亚哥举行,来自全球制药、生物技术、学术和政府机构的专家汇聚一堂。它有几个相互关联的技术路线,包括“配方和稳定性”和“分析和杂质”,这些都是spectradyne客户特别感兴趣的。尽管多年来蛋白质聚集一直是一个热门话题,但令人惊讶的是,许多研究人员在他们的实验室中仍然存在着“测量差距”,即用层析方法表征的非常小的聚集体(单体到50 nm)和用流动成像或光遮蔽表征的非常大的聚集体(大于2μm)。这正是spectradyne nCS1TM完美填充的尺寸范围,因此我们继续受到人们的好评,他们意识到在这个尺寸范围内的测量对于正确的测量非常重要。在我们的展台和我们的海报《用于配方不稳定性早期评估的亚微米蛋白质聚集测量》中,我们继续强调,更早地检测聚集可以为配方科学家在配方过程的早期节省大量时间和金钱。这一信息继续受到好评,特别是因为FDA现在正在强调这些特征在IND(研究新药)和NDA(新药申请)申请过程中的重要性。nCS1TM只需要3μL样品的事实也很关键,因为在早期配方过程的许多情况下,样品体积可以小到总共20μL。在今年的活动中,似乎新鲜的是,关于生物制剂的替代递送方法的话题有相当多的讨论。特别是,许多人都在谈论使用病毒载体(AAV、慢病毒等)。和工程细胞外小泡(EVS)作为生物制品的输送机制。人们对更有效地治疗中枢神经系统(CNS)疾病非常感兴趣,这些疾病需要一种跨越血脑屏障的机制,而病毒载体和EVS能够做到这一点。nCS1TM也非常适合于表征病毒载体和细胞外小泡,因此也可以帮助这一领域的研究人员。尤其重要的是正确描述样品浓度,因为这与剂量相对应。与其他(特别是光学)方法相比,nCS1的电子检测方法提供了更好的浓度测量,只需几分钟,而不是传统的基于分析的滴度的几小时。在这次活动中,我们看到了许多现有客户,并与许多新的潜在客户进行了交谈。参加这样的活动对我们来说是一个极好的机会,让我们了解这个市场目前和未来的需求,以便我们可以更好地调整我们的技术,以帮助这一重要科学的进步。返回目录请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客!发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。查看spectradyne独特技术的概述

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spectradyne参加2019年应用药物纳米技术展

Spetradyne很高兴(连续第二年)赞助10月下旬在马萨诸塞州剑桥市辉瑞公司举行的为期一天的应用制药纳米技术活动。这项一年一度的活动由非营利性组织波士顿协会主办,聚集了来自工业界、学术界和监管部门的专家,讨论与纳米技术在制药中的使用有关的热门问题。 Spectradyne与辉瑞联合展示了一张海报,题为《复杂介质中纳米粒子无标签PK评估的模拟》。这张海报详细介绍了spectradyne和辉瑞公司共同完成的工作,以考察将spectradyne的nCS1用作定量血浆等复杂生物基质中的纳米颗粒药物产品的可能性,从而实现无标签PK评估。海报可以从spectradyne的网站上下载。Seer,Inc.技术副总裁兼总工程师Greg Troiano再次进行了最初的全体会议,向我们介绍了该公司过去一年的最新进展。SEER正在将一些非常令人兴奋的技术推向市场,以分析蛋白质组“以实现对生物学和疾病的理解的新见解和突破。”他们设计了多个纳米颗粒来采样蛋白质组,从而能够密切监测特定疾病标记物的存在和进展,这些标记物可用于驱动治疗决定。其中一位演讲者还偷看了一则公告(一个月后正式宣布),该公告称,一个公私财团承诺在波士顿大都会地区建立一个先进生物创新和制造的新中心。该中心计划于2021年底完工,通过提供生产设施来解决目前研究工作所需原材料短缺的问题,进一步巩固大波士顿在细胞和基因疗法方面的领先地位。目前,“研究人员必须等待长达18个月的时间,才能让不堪重负的商业制造商生产出他们工作所需的工程细胞和病毒载体,从而减缓了知识开发的步伐。”总体而言,这次活动信息丰富,并为自由讨论应用药物纳米技术工作人员面临的许多挑战提供了一个极好的论坛。有趣和令人兴奋的新工作被提出,表明这些技术的未来确实是光明的! 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 查看spectradyne独特技术的概述

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你真的在测量你的颗粒大小吗?对于MRPS,答案是肯定的

微流控阻性脉冲传感(MRPS)的主要优点之一是可以直接测量颗粒体积。这种测量方法与基于光散射的技术有很大的不同,后者首先假设所有粒子的形状都是球形的,然后根据测量的一些其他物理属性(例如,扩散的均方位移)来推断粒子直径。在MRPS中,测量的电响应与遮挡纳米收缩的粒子的体积成正比 。然而,为了容易地显示颗粒大小结果,每个颗粒的体积被转换为等效的球径(ESD)。然后根据ESD绘制颗粒浓度图,这是所有颗粒分析系统的典型做法。重要的是要记住,在RPS中,颗粒大小(体积)是直接测量和存储的,而在光散射系统中,颗粒大小是根据假设颗粒是球形的扩散行为计算出来的。 为了说明MRPS的这一特性是如何表现出来的,下面的例子可能会很有用。在nCS1 MRPS系统中测量了客户提供的病毒样本。单体的分布在136 nm处有一个清晰的峰(见右图)。在~170 nm附近也可以看到一个小的二次“驼峰”,如体积加权颗粒尺寸分布的右侧所示。在170 nm处看到的数据中的驼峰表明存在病毒二聚体。记住,nCS1是测量体积的,ESD是体积的立方根,二聚体的体积是单体体积的两倍,相当于单体ESD的1.25倍。在这种情况下,单体在136 nm ESD处,二聚体正好出现在预期的170 nm处。另一个有趣的例子是客户提供的一种圆柱形病毒。客户的电子显微镜数据显示,病毒是一个直径~65 nm,长度~180 nm的圆柱体。给定这些尺寸,我们计算圆柱体的体积,然后计算相同体积的球体的ESD,这预测病毒的ESD约为100 nm。如右侧第二张图所示,这正是nCS1所测量的!NCS1 MRPS系统首先提供更高的分辨率,但它直接测量体积的事实也产生了对颗粒尺寸分布的更有价值的洞察! 返回目录请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客!发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。用Spetradyne的nCS1TM测定的病毒样本,显示了单体和二聚体病毒颗粒根据ESD绘制的圆柱形病毒颗粒

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你在听你的数据吗?

每个从事纳米颗粒配方工作的人都习惯于使用统计方法来描述它们的混合物。本博客的读者将熟悉Spectrtradyne用来传达nCS1捕获的关于大小和浓度的高分辨率信息的浓度谱密度(CSD),例如右侧的曲线图,显示了3种校准微珠尺寸的混合物(505 nm、990 nm和1760 nm直径微珠)。只显示了一次10秒采集的数据,因此统计数据略有噪音。这个博客的关注者也会习惯于看到时间域图,因为nCS1TM当然会计算每个粒子:右边第二个图显示了用于在其上方绘制CSD图的数据的时间轨迹。 展开垂直轴,我们可以看到505 nm粒子在右侧第三个图中的噪波底板上方通过。这一切都非常有趣,对于描述各种颗粒混合物都非常有用:细胞外小泡、病毒颗粒、聚集的蛋白质……但是,在spectradyne,我们热爱数据,我们总是在寻找更多的方法来挖掘它们能告诉我们的东西:你听过你的公式吗?我们把上面的时间域数据转换成音频文件,听一听,把声音调大:你能听到所有三个珠子的声音吗? 为了获得一种不同的、更丰富的聆听体验,我们还把它放慢了5倍,然后又慢了50倍。我们觉得通过这种方式我们对粒子有了更好的理解。请听一听这两个版本。第一,放慢了五次 接下来,放慢了50倍当然,这些都是人造珠子混合物。一个真实的客户样本在原始数据中听起来是什么样子?首先,实时:然后,放慢了50倍:为什么我们要用颗粒大小数据做这些事情?因为我们可以:nCS1TM确实可以测量经过的每一个粒子。你们现在的粒子仪能做到这一点吗?你在听你的数据吗?你想知道你的配方想告诉你什么吗?给我们打个电话!返回目录请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客!发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。一种三组分的珠子混合物,用spectradyne的nCS1TM测量上面的珠子混合物的10秒的时间域数据扩展垂直比例以显示最小的珠子(505 nm)

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任意多分散混合物的纳米颗粒测量

在这篇博客中,我们经常谈到正交测量的重要性,特别是当一个人拥有的所有测量都是基于光散射的计量时(例如,DLS,NTA)。诚然,这很好地满足了spectradyne的目的,因为毕竟,我们的技术是一种电子技术,它本质上与基于光散射的测量是正交的!然而,我们的MRPS技术的另一个至关重要的特点是,当颗粒通过传感体积时,它可以单独测量颗粒,因此对一个颗粒的测量不会影响另一个颗粒的测量(当然,在一定的浓度限制内)。这意味着Spetradyne的nCS1TM可以像测量单分散样品一样轻松地测量任意多分散样品。为了更好地理解这一点,让我们回顾一下,并确保我们理解了什么是“任意多分散”混合物。真的,这是一个奇怪的短语,也许是斯佩特拉德恩发明的。我们试图传达的意思很简单,spectradyne的MRPS技术可以准确地测量具有任何颗粒大小和浓度混合的混合物。让我们用一个四组分的聚苯乙烯珠子混合物的美丽曲线图来说明这一点,如右图所示。我们只在100 nm的大小范围内看到了四个不同的种群!此外,每个亚群的集中度很容易单独报告。现在,spectradyne的技术当然有分辨率限制,就像任何测量技术一样。比方说,如果两个峰之间的距离不是20 nm,而是5 nm,我们就不能完全分辨它们。但这一分辨率极限,与每个读数的尺寸测量不确定度有关,可以从单分散样品的测量中明确和理解,如果有人这样想的话。这不是由于样品的多分散性造成的。让我们来看看如果仪器不像nCS1TM那样具有测量独立性的核心属性会发生什么。在右边,我们看到了对约208纳米聚苯乙烯微珠的NTA测量。这是一个很好的情节。(请注意,为简单起见,在本次和后续的数据演示中,我们将仅使用归一化浓度单位,参考208 nm测量)。让我们再看几个单分散珠样的测量,94 nm和150 nm,并将这些单独的测量绘制在与208 nm的轴相同的轴上。这一组合图看起来也很棒--测量方法显然工作得很好。但是,如果我们把所有三个珠子种群放在同一个混合物中,并试图测量这种多分散的混合物,会发生什么?嗯,正如我们在第三次NTA测量中看到的那样,车轮有点像是从车上掉下来的。我们看到,对于150 nm的珠子测量到的浓度在某种程度上受到了抑制,可能是15%。但可怜的94纳米珠子完全消失了!发生了什么?我们希望你相信我们,94纳米的粒子仍然在那里。问题只是来自150 nm和208 nm珠子的散射光的强度掩盖了94 nm珠子的弱得多的散射光。这是一种我们称之为可变检测极限的现象,所有测量蛋白质聚集体或外切体的人都应该意识到这一点,因为它对你的结果有至关重要的影响。现在,我们确信您想知道当使用spectradyne的nCS1TM仪器时,同样的实验是什么样子的,所以请看这里。首先,让我们看看三个单分散样本,分别测量,并绘制在相同的轴上,在右边。与NTA的结果非常相似!然而,正如您可能预期的那样,nCS1TM对三组分混合物的测量看起来与NTA的测量结果有很大不同。使用MRPS技术,94 nm珠子的检测效果与单独测量时一样好。这是spectradyne基于MRPS的nCS1TM仪器的一个关键属性,因为许多生物混合物的严酷现实是它们是高度多分散的(如果不是完全“任意”的多分散!)。事实上,我们几乎可以向你保证,如果你只使用NTA或DLS来测量,你的细胞外小泡或蛋白质聚集体样本中的小颗粒比你想象的要多得多。让我们以另一种方式重复这一点,以防我们没有引起您的注意:如果您只使用NTA或DLS,您就没有准确地测量您的生物纳米颗粒样本。你甚至可能会有虚假的峰值,这是你测量局限性的产物。所有的地铁都有它们的局限性,我们绝不是说我们的MRPS技术也没有局限性。但我们希望,当您阅读这些博客条目时,您会理解spectradyne非常努力地诚实和开放地承认我们的局限性。与此同时,我们和你们一样是科学家,我们有责任揭露其他供应商的虚假声明,他们可能不像我们一样致力于这样的披露。祝你的纳米颗粒测量工作顺利,如果你有任何问题,请联系我们! 返回目录请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客!发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。用spectradyne的nCS1TM测量的四组分珠子混合物对208 nm直径的珠子进行了NTA测量分别对直径为94 nm、150 nm和208 nm的珠子进行NTA测量用NTA测量三种珠子直径的混合物(94 nm、150 nm和208 nm直径的珠子)使用spectradyne的nCS1TM分别测量三个珠子直径(94 nm、150 nm和208 nm直径的珠子)Spectradyne的nCS1TM同时测量三种珠径的混合物

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适用于多种应用的大动态范围

我们喜欢从我们的客户那里了解他们材料的科学知识,因为nCS1TM可以同样好地测量任何粒子类型,所以我们可以了解到非常广泛的应用。例如,科学家们经常使用spectradyne的nCS1TM来评估药物制剂的稳定性,量化细胞外小泡(EV)和外切体,表征脂质纳米颗粒和乳剂,滴定用于基因治疗的病毒,以及表征新型工业纳米材料。所有这些应用程序共有的一个分析要求是能够测量各种大小和浓度范围的颗粒。根据Spetradyne的经验,生物样本--无论是生物药物、尿囊、细胞培养液或血清--往往是高度分散的(无论DLS告诉你什么!)。准确测量这类样品中的浓度是困难的,我们认为spectradyne的nCS1TM是唯一可以做到这一点的技术。如果要准确地表征一种材料,拥有这些信息是至关重要的:在右侧,我们展示了对单个产品的测量,该产品包含直径从60 nm到6微米的囊泡,浓度接近9个数量级!颗粒功能在很大程度上取决于颗粒大小,而spectradyne的nCS1TM宽广的动态范围使研究人员能够完整而准确地了解样品中的成分,从而更好地了解其工作原理。我们的客户经常告诉我们,他们对nCS1的动态范围有多满意,直径从50 nm到10 μm,浓度从 104/mL到 1012/mL。要查看您的样品中所含物质的完整情况,请将样品发送给我们进行免费分析,或立即联系我们安排演示。 返回目录请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客!发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。对包含多种囊泡大小和浓度的样本进行nCS1TM分析

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蛋白质聚集体测量的灵敏度限制

在我们上一篇文章中,我们处理了细胞外小泡测量中的错误峰的棘手问题,特别是基于NTA的这些小泡的测量。这些假峰是诱人的,因为它们经常出现在一个大小范围内,研究人员可能希望在一个分离良好的外体样本中看到一个峰。我们还指出,导致假峰的“检测极限”(LOD)问题并不局限于外显体的测量,具体地说,甚至是生物纳米颗粒的测量。事实上,只要仔细测量聚苯乙烯珠粒的多分散混合物,错误的NTA测量就很容易看出(有关更多信息,请参阅我们的技术简报)。核心问题是,大颗粒比小颗粒散射的光要多得多,因此小颗粒的探测总是会被大颗粒的散射所遮挡(或多或少取决于用户设置,这是我们这里不讨论的另一个问题)。这真的与人们试图在明亮的月亮旁边的夜空中看到和计数微弱的星星,或者在附近城市的灯光“污染”存在的情况下看到和计算星星的困难没有什么不同。提醒一下,在右边,我们展示了之前的博客文章中给出的有关外显子检测的数据。在50 nm到400 nm的范围内,低温电子显微镜和SPECTRADYNE nCS1的测量结果非常吻合,而NTA的测量结果却低估了250 nm以下的粒子,尤其是130 nm以下的粒子。当然,外显体只是一种生物纳米颗粒,所以让我们把这个变得更有趣。正如我们前面所说的,可以从蛋白质聚集体中获得类似的数据,如右边第二张图所示。这些测量是在客户演示中现场进行的,客户直接收集了NTA数据。两种规格的色谱柱(TS-400和TS-2000,这里有更多关于微流控色谱柱的信息)用于nCS1测量,在略高于200 nm的重叠区有很好的一致性。让我们把绝对浓度水平的差异放在一边,因为我们没有独立可验证的衡量标准。更重要、更引人注目的是,这两个版本的形状不同。蓝色的nCS1数据显示,随着粒子尺寸的减小,粒子的浓度会迅速增加,而NTA数据则在130 nm左右显示了分布的峰值。不幸的是,在这种情况下,我们没有像低温电子显微镜这样的第三种正交测量来验证spectradyne的测量,但希望我们已经解释了这种假峰现象是如何发生的-它与前面显示的EV测量完全相同!(有关更多信息,请阅读我们的 技术简介)。)另一种思考蛋白质聚集结果的方法是退一步想一想,为什么蛋白质配方中会有一个大约120 nm的峰?单体、二聚体等比这个小得多,我们不知道任何自然发生的现象会导致种群在这个大小上达到最大值。一种更有可能的解释是,峰值是计量学的产物。顺便说一句,我们之所以切断60 nm处的nCS1数据,是因为nCS1测量在60 nm以下失去了灵敏度:正如我们之前强调的那样,所有计量学都有其检测极限。Spectradyne的不同之处在于,与我们的许多竞争对手不同,我们对我们知道无法测量的东西没有任何主张!当我们与生物制药界的大多数科学家一起回顾这类数据时,他们都接受这种错误的峰值解释。我们已经见过很多次了,我们教育社区正确解释聚合数据的能力有助于我们成功部署nCS1工具,为研究人员提供了公式不稳定的早期迹象。通过对蛋白质聚集体进行高精度测量,spectradyne的微流阻式脉冲传感(MRPSTM) 技术为公司节省了时间和金钱。只需3μL的样品,就可以比使用传统技术更早地检测到聚集。作为奖励,我们将帮助您了解测量的基本限制,这与其他仪器制造商不同。 返回目录请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客!发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。NTA法测定尿囊泡外切体 用nCS1和NTA测定应激蛋白质样本的比较

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Exosome纯化:当心虚假的峰值!

在之前的一篇博客文章(PepTalk博客)中,我们谈到了与仪器灵敏度的内在变异性有关的“检测极限”(LOD)问题,特别是在基于光散射的仪器中,特别是动态光散射(DLS)和纳米粒子跟踪分析(NTA)。Spetradyne的经验是,这在生命科学中是一个鲜为人知的话题,但对于试图量化其囊泡种群的大小、分布和浓度的胞外囊泡研究人员来说,这是至关重要的。事实上,我们已经看到了著名研究人员的明显例子(我们不会提到任何名字!)。他们相信他们已经成功地隔离了他们的电动汽车,而事实上,spectradyne的计量方法可以清楚地证明并非如此。话虽如此,如果这篇文章有点技术性,请原谅我们。右侧显示了我们想要展示的一个流行的图表,以激励这一讨论。这是通过测量尿囊泡得出的简单的NTA大小分布。这些数据不是由spectradyne获取的,而是由第三方获取的。它似乎在150 nm附近显示出一个清晰的峰,许多外显体研究人员会庆祝这样的测量,因为它似乎表明外显体分离成功。唉,这将是一个错误的结论,因为数据中显示的峰是一个幻影,或者,正如我们所说的,是一个假峰。我们怎么知道呢?好吧,幸运的是,这个样本是用三个正交法测量的。我们将NTA数据与同一样品的低温电子显微镜测量(右第二图)绘制在一起。现在,低温电子显微镜不是测量绝对浓度的好方法--所以让我们不要担心绝对尺度--但它是一种高度准确(也是昂贵的)相对评估颗粒物计数的方法,如果你对计数有耐心的话。这也是一种非光学方法,因此它对粒子的光学透明度不敏感。这一重要的正交法得出了与NTA测量截然不同的结论。是否在150 nm附近有一个峰值,或者粒子的浓度是否随着其尺寸的减小而急剧增加?我们需要的是第三种打破平局的方法。事实上,我们有这样一种方法(否则这将是一篇蹩脚的博客文章),形式是spectradyne的nCS1测量,我们将其添加到右侧的第三个绘图中(请注意,它是使用对数标尺绘制的)。在这里,我们看到nCS1测量和低温透射电子显微镜之间的良好一致性,精确到50 nm!现在,重要的是要记住,spectradyne的nCS1依赖于一种名为微流阻式脉冲传感 (MRPSTM)的电子检测方法,因此它与TEM和NTA本质上都是正交的。因此,我们有三种测量方法,它们依赖于完全不同的操作原理,三种方法中有两种是一致的。如何解释NTA测量到的显著较低的浓度,特别是低于130纳米,但开始高达250纳米?核心问题是光散射强度随颗粒直径的6次方而变化,因此小颗粒比大颗粒更难检测(有关更多信息,请参阅我们的技术简报)。在NTA数据中观察到的“峰”不是颗粒浓度的峰,而是指示NTA方法的检测限(LOD)的峰。巧合的是(也是令人困惑的),这种LOD经常发生在研究人员期望看到纯化的外切体峰的附近。这种现象的微妙性质加上无意中的确认偏差(即使是最训练有素的科学家也存在)导致了错误的结论。也许这篇博客的读者仍然持怀疑态度。毕竟,spectradyne似乎受益于指出竞争方法的技术局限性。虽然这可能是真的,但我们要强调的是,所有的地铁都有检测极限。Spectradyne的nCS1也没有什么不同:如果我们试图测量50纳米以下的外切体,我们将无法检测到它们。无论如何,如果我们尝试将测量结果绘制在50纳米以下,我们将显示人口数量正在下降。这并不意味着没有直径为40纳米的粒子,而只是意味着我们无法检测到它们!我们的MRPS方法和其他方法一样有其局限性,但Spetradyne的数据呈现和解释更具科学性。最后一点:在NTA测量或任何光学测量中,外体的低折射率对比度(高透明度)加剧了假峰现象。但事实上,即使是在聚苯乙烯珠子等高对比度颗粒的混合物中,这种现象也很容易被证明。要想直观地展示这一点,请查看这张海报。就目前而言,这可能已经足够了。我们将通过一个简单的观察来总结,如果在处理像外切体和聚苯乙烯珠这样不同的颗粒时,尺寸分布测量可能会产生误导,那么在处理任何类型的多分散混合物时,它们实际上都是一个挑战。我们的下一篇文章将通过蛋白质聚集测量来进一步说明这一点。 返回目录 请继续关注我们的博客,我们与您分享有关纳米粒子科学的见解、技术细节和一般极客! 发送电子邮件给我们 以获取更多信息,或直接讨论您的特定应用程序。 NTA法测定尿囊泡外切体 同一尿囊外切体样本,比较NTA和透射电子显微镜的结果 同样的尿囊外切体样本,将spectradyne的nCS1与NTA和TEM进行比较(请注意,这是按对数比例绘制的)

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