在我们上一篇文章中，我们处理了细胞外小泡测量中的错误峰的棘手问题，特别是基于NTA的这些小泡的测量。这些假峰是诱人的，因为它们经常出现在一个大小范围内，研究人员可能希望在一个分离良好的外体样本中看到一个峰。
我们还指出，导致假峰的“检测极限”(LOD)问题并不局限于外显体的测量，具体地说，甚至是生物纳米颗粒的测量。事实上，只要仔细测量聚苯乙烯珠粒的多分散混合物，错误的NTA测量就很容易看出(有关更多信息，请参阅我们的技术简报)。核心问题是，大颗粒比小颗粒散射的光要多得多，因此小颗粒的探测总是会被大颗粒的散射所遮挡(或多或少取决于用户设置，这是我们这里不讨论的另一个问题)。这真的与人们试图在明亮的月亮旁边的夜空中看到和计数微弱的星星，或者在附近城市的灯光“污染”存在的情况下看到和计算星星的困难没有什么不同。
提醒一下，在右边，我们展示了之前的博客文章中给出的有关外显子检测的数据。
在50 nm到400 nm的范围内，低温电子显微镜和SPECTRADYNE nCS1的测量结果非常吻合，而NTA的测量结果却低估了250 nm以下的粒子，尤其是130 nm以下的粒子。
当然，外显体只是一种生物纳米颗粒，所以让我们把这个变得更有趣。正如我们前面所说的，可以从蛋白质聚集体中获得类似的数据，如右边第二张图所示。
这些测量是在客户演示中现场进行的，客户直接收集了NTA数据。两种规格的色谱柱(TS-400和TS-2000，这里有更多关于微流控色谱柱的信息)用于nCS1测量，在略高于200 nm的重叠区有很好的一致性。让我们把绝对浓度水平的差异放在一边，因为我们没有独立可验证的衡量标准。更重要、更引人注目的是，这两个版本的形状不同。蓝色的nCS1数据显示，随着粒子尺寸的减小，粒子的浓度会迅速增加，而NTA数据则在130 nm左右显示了分布的峰值。
不幸的是，在这种情况下，我们没有像低温电子显微镜这样的第三种正交测量来验证spectradyne的测量，但希望我们已经解释了这种假峰现象是如何发生的-它与前面显示的EV测量完全相同！(有关更多信息，请阅读我们的 技术简介)。)
另一种思考蛋白质聚集结果的方法是退一步想一想，为什么蛋白质配方中会有一个大约120 nm的峰？单体、二聚体等比这个小得多，我们不知道任何自然发生的现象会导致种群在这个大小上达到最大值。一种更有可能的解释是，峰值是计量学的产物。顺便说一句，我们之所以切断60 nm处的nCS1数据，是因为nCS1测量在60 nm以下失去了灵敏度：正如我们之前强调的那样，所有计量学都有其检测极限。Spectradyne的不同之处在于，与我们的许多竞争对手不同，我们对我们知道无法测量的东西没有任何主张！
当我们与生物制药界的大多数科学家一起回顾这类数据时，他们都接受这种错误的峰值解释。我们已经见过很多次了，我们教育社区正确解释聚合数据的能力有助于我们成功部署nCS1工具，为研究人员提供了公式不稳定的早期迹象。通过对蛋白质聚集体进行高精度测量，spectradyne的微流阻式脉冲传感(MRPSTM) 技术为公司节省了时间和金钱。只需3μL的样品，就可以比使用传统技术更早地检测到聚集。作为奖励，我们将帮助您了解测量的基本限制，这与其他仪器制造商不同。
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NTA法测定尿囊泡外切体
用nCS1和NTA测定应激蛋白质样本的比较
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Spectradyne是纳米颗粒微流控测量领域的世界领先者。
使用电阻脉冲传感的纳米颗粒分析避免了与DLS和光学跟踪相关的许多困难。Spectradyne是唯一一家提供微流控粒度分析的公司。