Spetradyne的粒子分析博客

当每个粒子都计数时

Extracellular vesicles exosomes nanoparticles gene therapy are all done here

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使用阳性对照确保颗粒大小和浓度的准确性

让我们面对现实吧,大多数颗粒分析仪几乎就是“黑匣子”:你把样品放进去,一段时间后你就会得到一个结果,无论它是真实的颗粒尺寸分布还是动态光散射(DLS)中的平均尺寸。当然,任何这些系统的“校准”都可以通过运行NIST可追踪的、以已知浓度混合的聚苯乙烯(或二氧化硅)珠子来检查。然而,这些珠子在任何给定仪器上的性能(在水中或在PBS中)可能不能代表同一仪器对您的实际样品的反应。对于光学系统尤其如此,其中样品颗粒和悬浮介质的折射率(可能还有粘度或其他因素)都会影响仪器的响应。

Spectrtradyne的微流控电阻脉冲传感(MRPS)的众多优势之一是,测量完全不依赖于颗粒材料和光学特性,如粘度或折射率。事实上,MRPS直接测量粒子体积:这意味着由纯金制成的体积为X的粒子将给出与相同体积的空心粒子相同的测量结果。因此,在MRPS系统的情况下,测量(任何材料的)校准珠时的性能直接指示仪器在任何其他样品颗粒上的性能,而对于光学系统则不是这样。

另一个优势是样本量小:MRPS技术使用的微流控墨盒需要非常小的样本量,对于spectradyne的nCS1,只需要3微升,足够小,可以可靠地测量扁虱唾液样本

然而,MRPS的一个更大的优势是,每个颗粒都是单独测量的,一次测量一个。这意味着对任何给定颗粒的测量完全独立于样品中其他颗粒的测量。在纳米粒子跟踪分析(NTA)系统中则不是这样,在NTA系统中,可以证明这些仪器的检测限(LOD)根据样品成分的不同而变化,并可能导致虚假结果。

这意味着,对于MRPS系统中的测量,您实际上可以将已知浓度的校准球体直接添加到您的样品中作为阳性对照。通过这样做,您可以在样品中验证该仪器在颗粒大小浓度方面都是准确的。

右图显示了这在实践中是如何工作的示例。在spectradyne的nCS1TM MRPS系统中,细胞外小泡(EV)样品运行了两次:第一次是单独运行,第二次是在150 nm NIST可追踪的聚苯乙烯纳米球中添加浓度为2.04 × 109个颗粒/毫升的微球。可以看出,两种样品都能很好地重叠,而加标的样品在150 nm处有一个清晰的峰,测得浓度为2.04 × 109个颗粒/毫升。这种类型的测量内控制不能用基于光学的系统进行,因为光散射对直径的六级依赖导致掺入的控制珠会完全“屏蔽”仪器对样品颗粒的响应!

通过在MRPS系统中使用测量中的阳性对照,可以确保每次测量的颗粒大小和浓度的准确性。这在受监管的环境中可能尤其重要,在这种环境中,通过测量内控制大大简化了证明测量可追溯性的过程。

你的粒子分析仪能做到这一点吗?

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在spectradyne的nCS1TM MRPS系统中,EV样本测量了两次:一次是单独测量,然后是150 nm珠子的测量。图形重叠直观地显示了两者的重复性,而第二个样品中的加标准珠则定量地证明了测量的准确性。

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